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科學家探索264個肽的位點特異性糖基化,研究肽序列表征驅動機理
作者:固拓多肽合成公司    發(fā)布于:2021年07月30日
摘要:肽糖基化現(xiàn)象不僅存在于食物中,而且也存在于生物系統(tǒng)中,是一種重要的反應,但人們對它的了解還很有限。多肽的巨大異質性和糖基化反應的復雜性阻礙了對多肽衍生糖基化產(chǎn)物的大規(guī)模分析,也妨礙了理解其影響因素及其如何影響多肽的生物活性。

肽糖基化現(xiàn)象不僅存在于食物中,而且也存在于生物系統(tǒng)中,是一種重要的反應,但人們對它的了解還很有限。多肽的巨大異質性和糖基化反應的復雜性阻礙了對多肽衍生糖基化產(chǎn)物的大規(guī)模分析,也妨礙了理解其影響因素及其如何影響多肽的生物活性。

科學家探索264個肽的位點特異性糖基化,研究肽序列表征驅動機理

近期,慕尼黑工業(yè)大學一研究團隊就多肽的糖基化進行研究,分析時間分辨的 Amadori 產(chǎn)物形成,探索了264個肽的位點特異性糖基化,并在《Nature》發(fā)布綜述。

該項研究通過強度分析和深度計算序列反褶積解決了基于微觀異質性的肽糖基化差異,并顯示出特別反應肽集體。這些肽具有潛在的重要序列模式,這些序列模式出現(xiàn)在一些獨立來源的已建立的生物和感覺活性肽中,這表明該研究方法適用于整個系統(tǒng)。并且生成了一個模式肽圖,并提出在肽糖基化中,此處確定的分子檢查點可以作為序列反應性的指示。

糖基化是在酶的控制下,蛋白質或脂質附加上糖類的過程,起始于內質網(wǎng),結束于高爾基體。在糖基轉移酶作用下將糖轉移至蛋白質,和蛋白質上的氨基酸殘基形成糖苷鍵。蛋白質經(jīng)過糖基化作用,形成糖蛋白。糖基化是對蛋白的重要的修飾作用,有調節(jié)蛋白質,幫助蛋白質折疊功能作用。

科學家探索264個肽的位點特異性糖基化,研究肽序列表征驅動機理

在該項研究中,研究人員提出了一種直接的方法,通過使用高分辨率 MS 的強大功能結合多元統(tǒng)計和生物信息學來獲取有關 MR 中肽反應性和兩種反應影響的大規(guī)模信息,從而改進肽衍生 AP 的評估時間和糖濃度。這一對葡萄糖-胰蛋白胨模型系統(tǒng)的研究實現(xiàn)了迄今為止對肽 AP 的最深入分析。

任何基于 MS 的實驗都需要注意,檢測性會受到電離類型、分析物濃度以及樣品復雜性的影響。因此,在此數(shù)據(jù)集中可能會偏向于考慮特定的肽和 AP。但研究人員還是實現(xiàn)了對大型肽庫的深入表征,并提供了有關影響 AP 形成的肽特性的全面信息。

在本研究中觀察到明顯更慢的降解行為。不同的反應條件,如催化活性磷酸鹽緩沖液的濃度和溫度,往往會影響 AP 的穩(wěn)定性,也會影響肽的氨基酸序列。但在該數(shù)據(jù)集中檢測到的所有肽 AP 在所有時間點都保持在檢測限上。

在肽糖化中,反應行為由氨基酸序列驅動?;诙替滊哪P拖到y(tǒng)已經(jīng)提出了與 N 末端相鄰的氨基酸的重要作用。在這里,我們注意到對纈氨酸起始肽的糖基化的強烈偏好,并注意到肽的更明顯的 AP 形成,其中包含位于 N 末端氨基酸旁邊的 Ile、Leu Val。

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我們通過將 AP 映射到酪蛋白序列并相互映射,確定了特別容易發(fā)生早期糖基化反應的肽集合。研究人員利用這些反應性肽類來提供有關潛在重要的三序列模式的信息,并提出許多其他因素中的糖化模式促進了肽糖化,這通過糖化敏感性的強連通性和特定序列模式的存在來表明。總的來說,科學家們提供了一套全面的分子檢查點,用于估計糖化的肽反應性。

最后通過將胰蛋白胨肽映射到來自各種食物來源的大量生物活性和感官活性肽,建立了胰蛋白胨模型系統(tǒng)的全系統(tǒng)適用性。根據(jù)是否需要肽的糖化,我們建議可以相應地選擇氨基酸序列。對于功能性食品的開發(fā),必須保持健康益處,因此對于大多數(shù)生物活性肽而言,需要避免 AP 的形成。

與較大的肽類相比,小肽衍生的 MRP 具有卓越的抗氧化特性,這使得胰蛋白胨特別適合鑒定潛在的候選肽。觀察了來自 47 種氨基化合物的 AP,其中 34% 的生物活性先前已確定,93% 被鑒定為生物活性肽的亞結構,這表明生物活性肽特別容易發(fā)生糖化。對于感官活性肽,其他人觀察到與單獨加熱酪蛋白肽相比,MRP 的苦味降低,而抗氧化特性增加。其他來源的肽也有類似的發(fā)現(xiàn)。因此,通過選擇合適的候選肽可以為食品生產(chǎn)提供更多好處,例如增強食品的感官特性。

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未來需要研究來自不同蛋白質的更廣泛的肽,從而研究更廣泛的氨基酸序列,以獲得關于氨基酸組成和序列模式相關性的更多信息。由高度特異性合成肽制備的模型系統(tǒng)在先前的研究中提供了有價值的發(fā)現(xiàn),這表明對肽的靶向研究,特別是具有潛在相關序列模式的研究,可能有望用于鑒定特別容易發(fā)生肽糖化的肽。該策略還提供了確定對糖化反應較不敏感肽的機會。

寫到最后:

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