填充柱的柱效、背壓會(huì)受多肽色譜填料顆粒的粒徑和分布情況所影響。小粒徑色譜填料的價(jià)格相對(duì)來說會(huì)高一些，填料粒徑小不僅會(huì)導(dǎo)致填充柱的柱效高還會(huì)導(dǎo)致柱壓變高，若要提高分離度，必須要在相同的條件下提高柱效。填料粒徑小還會(huì)對(duì)色譜系統(tǒng)要求高，設(shè)備投資大。

基于以上原因，多肽色譜填料的粒徑大小不同，分離效率和成本也不同，所以通常粒徑在10微米以上的多肽色譜填料顆粒應(yīng)用于工業(yè)制備，粒徑在3-5微米之間的填料用于常規(guī)HPLC，2微米以下的色譜填料常用于UPLC。

同樣，色譜填料的粒徑分布情況對(duì)高效液相色譜分離過程也有一定的影響，是色譜填料性能的重要參數(shù)。當(dāng)填料顆粒粒徑的大小統(tǒng)一、在填充柱床上分布緊密程度的不統(tǒng)一，粒狀填料間的間隙流動(dòng)通路不一樣，便會(huì)導(dǎo)致填充柱內(nèi)的路徑不統(tǒng)一從而產(chǎn)生多路徑效應(yīng)。填充柱床上面的溶質(zhì)分子的流動(dòng)路徑和保留時(shí)間各不相同，導(dǎo)致色譜峰變寬，影響溶質(zhì)分子分離結(jié)果。

當(dāng)相同的溶質(zhì)分子流過色譜柱時(shí)，若色譜微球填料粒徑分布不均，就會(huì)在填充柱床內(nèi)產(chǎn)生不同的通路，導(dǎo)致經(jīng)過的路徑長短不同，色譜峰變寬，塔板數(shù)變小，柱效降低。

想要有較好的溶質(zhì)分子分離效果，必須要保證使用的色譜填料粒徑、分布情況一致。這樣會(huì)減少多路效應(yīng)，使填充柱床上面的溶質(zhì)分子的流動(dòng)路徑和保留時(shí)間一致，從而色譜峰變窄，理論塔板數(shù)升高，達(dá)到的柱效更高。

寫到最后:

杭州固拓生物科技有限公司定制多肽合成業(yè)務(wù):藥物肽、臨床肽、訂書肽、淀粉肽、醛肽、環(huán)肽、二硫鍵搭橋多肽、穿膜肽、各種抗菌肽、美容肽、磷酸化肽、PEG肽、偶聯(lián)BSA和KLH抗原肽、各類酸修飾多肽、各種胺類化合物修飾多肽(苯胺、異戊胺、二乙胺)、各類榮光標(biāo)記(FITC、FAM系列、DOTA、TAMRA系列、Cy系列)同位素肽等。

原創(chuàng)文章如有轉(zhuǎn)載，請(qǐng)注明出處“本文首發(fā)于固拓多肽合成生物科技有限公司(www.tyxjkl.com)”